I prudutti

E cellule eucariote cuntenenu un equilibriu delicatu di quantità minuti di i quattru trifosfati desossiribonucleosidi (dNTPs), abbastanza solu per uni pochi minuti di replicazione di DNA.Sia una carenza è un surplus di un unicu dNTP pò risultà in un incrementu di i tassi di mutazione, a riparazione di DNA difettosa o l'esaurimentu di l'ADN mitocondriale.I dNTP sò generalmente quantificati da un esame enzimaticu in quale l'incorporazione di dATP radioattivu (o dTTP radioattivu in l'analisi per dATP) in oligonucleotidi sintetici specifichi da una DNA polimerasi hè proporzionale à a cuncentrazione di dNTP scunnisciutu.Truvemu chì l'ADN polimerasi di Klenow aduprata cumune pò rimpiazzà u ribonucleotide currispundente per u dNTP scunnisciutu chì porta in certi casi à una grande soprastimazione di dNTP.Avà descrivimu e cundizioni di analisi per ogni dNTP chì evitanu l'incorporazione di ribonucleotidi.Per i saggi dTTP è dATP, basta à minimizzà a cuncentrazione di l'enzima Klenow è di dATP marcatu (o dTTP);per dCTP è dGTP avemu avutu a rimpiazzà l'enzima Klenow cù a Taq DNA polymerase o Thermo Sequenase.Suggeremu chì in certi rapporti precedenti l'incorporazione di ribonucleotide pò avè causatu valori troppu altu per dGTP è dCTP.