I prudutti

A fosforilazione di a proteina regula diverse funzioni cellulari è ghjoca un rolu chjave in u sviluppu iniziale di e piante.Per cumplementà è espansione investigazioni precedenti di fosforilazione di proteine ​​​​in piantini di Arabidopsis avemu utilizatu un approcciu alternativu chì combina l'estrazione di proteine ​​​​in cundizioni non denaturanti cù l'arricchimentu di cromatografia di affinità di ioni metallici immobilizzati (IMAC) di fosfoproteini intatti in estratti di Rubisco-depleted, seguita da identificazione. utilizendu l'elettroforesi in gel bidimensionale (2-DE) è a spettrometria di massa cromatografia liquida-tandem (LC-MS/MS).A digestione in-gel di tripsina è l'analisi di spots di gel selezziunati identificanu 144 peptidi fosforilati è residui, di i quali solu 18 phosphopeptides è 8 phosphosites sò stati trovati in a basa di dati di u situ di fosforilazione di PhosPhAt 4.0 è P3DB Arabidopsis thaliana.Più di a mità di i 82 fosfoproteini identificati eranu implicati in u metabolismu di carbuidrati, a fotosintesi / respirazione o i meccanismi di risposta di stress oxidativu.L'arricchimentu di fosfoproteini intatti prima di 2-DE è LC-MS / MS pare chì aumentà a rilevazione di residui di treonina fosforilata è tirosina paragunatu à i metudi chì utilizanu l'arricchimentu à livellu di peptide, suggerendu chì i dui approcci sò un pocu cumplementari in termini di copertura di u situ di fosforilazione.Paragunendu i risultati per e piantini ghjovani cù quelli ottenuti prima per e foglie mature d'Arabidopsis identificanu cinque proteine ​​​​chì sò fosforilate di manera differenziale in questi tessuti, dimustrendu u putenziale di sta tecnica per investigà a dinamica di a fosforilazione di a proteina durante u sviluppu di a pianta.