I prudutti

Simile à l'altri virus RNA di filamentu pusitivu, i tombusvirus sò riplicati da u complexu di replicasi virali ligati à a membrana (VRC).U VRC hè custituitu da a RNA polimerasi dipendente da RNA codificata da virus p92 (RdRp), a chaperone virale p33 RNA, è parechje proteine ​​​​ospiti cooptate.Per diventà un RdRp funziunale dopu a so traduzzione, a proteina di replicazione p92 deve esse incorporata in u VRC, seguita da a so attivazione.Avemu dimustratu prima in un analisi basatu in estratti di levadura senza cellule chì l'attivazione di u Tomato bushy stunt virus (TBSV) RdRp richiede un fattore ospite solubile.In questu articulu, identificemu a proteina di scossa di calore cellulare 70 (Hsp70) cum'è u fattore d'ospite coopted necessariu per l'attivazione di un TBSV RdRp recombinante truncatu N-terminalmente.Inoltre, u bloccu basatu in picculi molecule di a funzione Hsp70 impedisce a sintesi di RNA da u tombusvirus RdRp in vitro.Inoltre, mostramu chì i fosfolipidi neutri, vale à dì, fosfatidiletanolamina (PE) è fosfatidilcolina (PC ), aumentanu l'attivazione di RdRp in vitro.In cuntrastu, phosphatidylglycerol (PG) mostra un effettu inhibitore forte è dominante nantu à l'attivazione RdRp in vitro.Avemu ancu dimustratu chì PE è PC stimulanu l'interazione RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA], mentre chì PG inibisce a ligame di l'RNA virali à u RdRp.Basatu nantu à i roli stimulatori versus inibitori di diversi fosfolipidi in l'attivazione di RdRp di tombusvirus, pruponemu chì a cumpusizioni di lipidi di e membrane subcellulari destinate puderia esse aduprata da i tombusvirus per regulà a nova assemblea di VRC durante u cursu di l'infezione. (RdRp), chì hè rispunsevuli di sintetizà a progenie di RNA virali in e cellule infettate di parechji virus RNA di filamentu pusitivu, hè inizialmente inattivu.Questa strategia hè prubabile di evità a sintesi di RNA virali in u citosol chì porta rapidamente à l'induzione di risposti antivirali cellulari attivati ​​da RNA.Durante l'assemblea di u cumplessu di replicase ligati à a membrana, u RdRp virali hè attivatu per un prucessu incompletamente capitu chì rende a RdRp capace di sintesi di RNA.Utilizendu TBSV RdRp, dimustremu chì a chaperone cellulare Hsp70 cooptata è i fosfolipidi neutri facilitanu l'attivazione di RdRp in vitro.In cuntrastu, phosphatidylglycerol (PG) hà un effettu inibitore dominante nantu à l'attivazione RdRp in vitro è l'interazione RdRp-virale RNA, suggerendu chì u microdomain membranoso chì circundava l'RdRp influenza assai a so capacità per a sintesi di RNA.Cusì, l'attivazione di l'RdRp virali probabilmente dipende da parechji cumpunenti di l'ospiti in e cellule infettate.