I prudutti

L'analisi di l'avvenimenti di fosforilazione di u proteoma hè sempre una sfida analitica maiò per via di l'enorme cumplessità di e rete di fosforilazione di e proteine.In questu travagliu, valutemu a cumplementarità di Lys-N, Lys-C è tripsina in quantu à a so capacità di cuntribuisce à l'analisi globale di u fosfoproteoma.Una versione raffinata di u scambiu di cationi forte à pH bassu hè stata aduprata per separà efficacemente i peptidi acetilati, fosforilati è non modificati N-terminali.Un totale di 5036 fosfopeptidi non redundant puderia esse identificatu cù un tassu di scuperta falsa di <1% da 1 mg di proteina cù una cumminazione di i trè enzimi.I nostri dati anu revelatu chì a sovrapposizione trà i setti di dati di fosfopeptidi generati cù diverse proteasi era marginale, mentre chì a sovrapposizione trà dui gruppi di dati triptichi generati in modu simile hè stata trovata almenu 4 volte più alta.In questu modu, l'usu parallelu di Lys-N è tripsina hà permessu un aumentu di u 72% in u numeru di fosfopeptidi rilevati in quantu à a tripsina solu, mentre chì un esperimentu di replicazione di tripsina hà purtatu solu à un aumentu di 25%.Cusì, quandu fucalizza solu nantu à a tripsina è a dati Lys-N, avemu identificatu 4671 fosfopeptidi non redundant.Ulteriori analisi di i siti rilevati anu dimustratu chì i setti di dati di Lys-N è tripsina sò stati arricchiti in motivi di fosforilazione significativamente differenti, evidenza ancu chì l'approcci multiproteasi sò assai preziosi in l'analisi di fosfoproteoma.